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觀賞植物組織培養中玻璃化問題的解決方案
日期:2008-07-23     來源:中國組培網     作者:   我要評論()



  20世紀30年代發展起來的植物組培技術經過幾十年的探索,已經在科研和生產上得到了廣泛應用,并已經成為觀賞植物快繁的重要途徑。但是,試管苗玻璃化現象嚴重降低了植物組培的效率,造成人力、物力、財力的極大浪費,成為當今組培工作尤其是工廠化生產和試管材料保存的一大障礙。自1981年Debergh首先提出了試管植物“玻璃化作用(vitrification)”的概念以來,關于植物組織培養中玻璃化的原因和防止措施的研究報道很多,并積累了一定的數據與經驗。

  玻璃苗是在試管內控制條件下培養植物的產物,是人工提供的培養基和培養條件不完全符合培養物固有需要的結果,培養基和培養條件不適宜、不平衡是試管苗玻璃化發生的直接原因。植物試管苗玻璃化是組培過程中的三大難題之一,試管苗玻璃化問題的解決必將有助于提高整個植物組織培養的科學水平和經濟效益,因此,在實際工作中有必要采取措施使觀賞植物試管苗的玻璃化現象降低到最低限度,直至消除玻璃化現象。隨著對玻璃化研究的深入,在控制玻璃苗發生時,大多研究者均采用如下措施:選不易玻璃化的品種及部位做外植體材料。不同植物種類適宜的外植體部位可能不同,周菊華等認為瑞香中部莖段發生玻璃化的幾率最大,而吳若箐等的結果表明香石竹的基部莖段發生玻璃化的可能性最大,這可能與不同植物的生理特性有關。

  利用固體培養基,增加瓊脂濃度,選擇適當的碳源,提高培養基中蔗糖含量,從根本上降低培養基中的滲透勢,造成細胞吸水阻遏,減少培養基中植物材料可獲得的水分,因而可明顯降低觀賞植物試管苗玻璃化現象。采用通氣性好的封口材料如紗布、脫脂棉等代替聚乙烯塑料膜作為封口材料,可降有效低培養容器內部環境的相對濕度,減輕有害氣體的積累,使植物光合作用順暢。培養基中BA是導致試管苗玻璃化的一個重要原因,選擇搭配合適的激素,適當降低培養基中BA的濃度均可減輕玻璃苗的出現。通過培養條件(溫度和光照)減少玻璃苗的發生。控制溫度,避免過高的培養溫度,進行變溫處理,適當低溫處理可消除玻璃化,提高光照強度,適當延長光照時間,充分利用自然光照也可以減低玻璃苗的發生頻率。

  另外,在培養基中減少或除去NH4NO3,附加活性炭、青霉素、聚乙烯醇(PVA)、Ca、赤霉素(GA)及多效唑(PP333)等,減少繼代培養的次數等措施均可降低觀賞植物組培過程中玻璃苗的發生。

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